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    高表达P2X7受体ICN1诱导小鼠淋巴细胞白血病模型

    原创版权
    咨询量:  
    更新时间:2025-03-15  /
    咨询工程师

    模型信息

    中文名称:高表达P2X7受体ICN1诱导小鼠淋巴细胞白血病模型

    英文名称:B6.SJL-PtprcaPepcb/BoyJ

    类型:白血病动物模型

    分级:NA

    用途:用于白血病研究。

    研制单位:中国医学科学院血液病医院

    保存单位:中国医学科学院血液病医院

    研究背景

    急性淋巴细胞白血病(ALL)是一种起源于淋巴细胞的B系或T系细胞在骨髓内异常增生的恶性肿瘤性疾病。异常增生的原始细胞可在骨髓聚集并抑制正常造血功能,同时也可侵及骨髓外的组织,如脑膜、淋巴结、性腺、肝等。ALL儿童期(0~9岁)为发病高峰,可占儿童白血病的70%以上。ALL在成人中占成人白血病的20%左右。临床表现为贫血、出血、感染和发热、脏器浸润、代谢异常等。

    制备方法

    SPF级6-8周龄鼠,C57BL/6J小鼠(CD45.2), B6.SJL-PtprcaPepcb/BoyJ小鼠(B6.SJL,CD45.1)。

    1. 病毒准备

    细胞:293T

    表达载体:MSCV- ICN1 -IRES-GFP,MSCV- P2X7-IRES-BFP。

    2. 实验动物

    可使用SPF级别的6-8周龄鼠, C57BL/6J小鼠(CD45.2), B6.SJL-PtprcaPepcb/BoyJ小鼠(B6.SJL,CD45.1)。

    3. 细胞准备:

    取B6.SJL小鼠的骨髓细胞,利用C-kit+磁珠,富集C-kit+造血干祖细胞

    4. 病毒感染

    富集的小鼠C-kit+造血干祖细胞,体外感染表达MSCV- ICN1 -IRES-GFP的逆转录病毒,感染后培养48h。

    5. 细胞回输

    感染后的C-kit+造血干祖细胞利用流式细胞仪分选出GFP+的细胞,通过尾静脉注射到致死剂量照射C57BL/6J小鼠体内,每周检测GFP+细胞的比例。

    6. 病毒二次感染及回输

    当检测到小鼠外周血GFP+细胞的比例超过50%,处死小鼠,取小鼠骨髓细胞,

    评价验证

    1. 模型分析指标

    (1) 症状观察

    细胞回输后小鼠症状表现为:竖毛、弓背。

    (2) 流式检测

    在细胞回输后的一周后,每周检测外周血GFP+ BFP+细胞的比例,有出现GFP+ BFP+细胞,即为模型成功。

    2. 表型信息

    2.1 动物症状观察

    表现为体重减轻、弓背竖毛,在回输后的一个月后死亡。

    生物安全性

    实验中涉及动物的操作程序已经得到中国医学科学院医学实验动物研究所实验动物使用与管理委员会的批准(ILAS-GC-2012-001)。

    讨论与结论

    动物症状观察:

    表现为体重减轻、弓背竖毛,在回输后的一个月后死亡。

    了解中析

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